›› 2014, Vol. 16 ›› Issue (2): 149-154.DOI: 10.13304/j.nykjdb.2014.012
刘中成1,解瑶1,张艳芬2,赵丽健1,刘利鹏1,肖敏华3
LIU Zhong\|cheng1, XIE Yao1, ZHANG Yan\|fen2, ZHAO Li\|jian1, LIU Li\|peng1, XIAO Min\|hua3
摘要:
为了建立一种简单、高效制备高纯度单链DNA方法,用于SELEX技术筛选过程中次级文库的筛选,对制备链霉亲和素磁珠的实验条件进行了优化,确定了对称PCR产物与链霉亲和素磁珠偶联的最佳时间和饱和度,并验证了不同浓度NaOH对解链效果的影响,建立了适于SELEX技术的单链DNA制备体系。利用荧光法和聚丙烯酰胺凝胶电泳对本实验所建立方法及传统不对称PCR法制备单链DNA的回收效率和纯度进行了比较,结果表明在最优实验条件下用磁性分离法制备的单链DNA纯度及回收效率均显著高于不对称PCR法。
中图分类号: