中国农业科技导报 ›› 2019, Vol. 21 ›› Issue (11): 43-50.DOI: 10.13304/j.nykjdb.2019.0369
李霞1,2,范鑫2,梁成真2,王远2,张锐2,孟志刚2*,刘晓东1*,孙国清2*
LI Xia1,2, FAN Xin2, LIANG Chengzhen2, WANG Yuan2, ZHANG Rui2, MENG Zhigang2*, LIU Xiaodong1*, SUN Guoqing2*
摘要: BS2蛋白来源于枯草芽孢杆菌B111,具有较强的黄萎病抗性,能抑制黄萎病菌孢子萌发并破坏其菌丝生长。BS2基因全长1 566 bp,共522个密码子,由于物种间偏爱密码子的差异,若不对其进行密码子优化而直接导入植物,会造成基因表达量低甚至不表达。按植物密码子对BS2基因进行优化合成,共优化了332个密码子;生物信息学分析得出:1~28位氨基酸为N端信号肽,成熟的BS2蛋白由224~521位氨基酸构成,是一种中性锌金属肽酶;亚细胞定位将BS2蛋白定位于细胞膜;牛津杯法检测得出转基因烟草株系的蛋白粗提液有很强的抑菌活性;未侵染黄萎病菌的对照组,T1代转基因植株与野生型长势基本一致、表型无明显差异;黄萎病菌V991侵染组,转基因烟草的表型性状明显优于野生型,且两组中转基因烟草的SOD、CAT活性和SA、ABA含量均显著高于野生型,说明BS2基因可以显著提高转基因烟草的黄萎病抗性。