棉花GhSRK2D基因的分子克隆及其功能分析

doi:doi:10.3969/j.issn.1008-0864.2012.06.07

›› 2012, Vol. 14 ›› Issue (6): 36-42.DOI: doi:10.3969/j.issn.1008-0864.2012.06.07

棉花GhSRK2D基因的分子克隆及其功能分析

林发壮1,2,张锐1,孙国清1,孙豹1,郭三堆1*

(1.中国农业科学院生物技术研究所, 农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程, 北京 100081;
2.福建省三明市农业科学研究所, 福建沙县 365000)

出版日期:2012-12-15 发布日期:2012-12-17
通讯作者: 郭三堆，研究员，博士生导师，研究方向为植物基因工程。Email：gsdui@mail.caas.net.cn
作者简介:林发壮|硕士研究生|研究方向为植物分子育种。Email：lfz0lfz@163.com。
基金资助:
国家转基因生物新品种培育重大专项（2011ZX08005-004）资助。

Molecular Cloning and its Functional Analysis of GhSRK2D Gene from Cotton

LIN Fa-zhuang1,2, ZHANG Rui1, SUN Guo-qing1, SUN Bao1, GUO San-dui1*

(1.Biotechnology Research Institute, National Key Facility of Crop Gene Resources and Genetic Improvement, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081|2.Sanming Institute of Agricultural Sciences, Fujian Shaxian 365000, China)

Online:2012-12-15 Published:2012-12-17

摘要/Abstract

摘要：

SnRK2类蛋白激酶在植物抵御非生物胁迫上起到非常重要的作用，可将其作为候选基因，通过转基因方式对作物进行耐旱性改良。本研究利用RACEPCR技术从陆地棉分离到一个SnRK2同源基因GhSRK2D。生物信息学分析表明GhSRK2D属SnRK2sⅢ亚家族；GhSRK2D蛋白含有N豆蔻酰化位点，跨膜结构域和5个核心的丝氨酸残基位点；另外， GhSRK2D蛋白的C末端保守结构也包含Osmotic Box、SnRK2 Box 和 ABA Box。 Southern杂交分析GhSRK2D基因在Y18生态型棉花基因组中含有两个拷贝；Realtime PCR分析显示GhSRK2D在棉花不同组织器官中均有表达，在叶器官中表达量最高；且受ABA、高盐、高渗（甘露醇）及低温胁迫的诱导。这些结果预示了棉花GhSRK2D基因可能在非生物胁迫逆境下参与抗逆相关生理过程发挥重要作用。

关键词: 棉花;ABA;非生物胁迫;GhSRK2D/GhSnRK2.2

Abstract:

The protein kinases SnRK2s play important roles in abiotic stress response in plants and likely act as candidate genes for improving stress tolerance in crops through transgenic approaches. In this study, SnRK2 homologous, GhSRK2D was isolated from the Y18 upland cotton via RACEPCR. Bioinformatics analysis indicated that GhSRK2D belonged to SnRK2sⅢ subfamily, containing the Nmyristoylation sites and transmembrane domains, and 5 core serineresidues sites. Additionally, Osmotic box, SnRK2 box and ABA box were also found in the end of Cterminal conserved domain of protein GhSRK2D. Southern blot results showed that GhSRK2D gene had 2 copies in cotton Y18 ecotype genome. Realtime PCR showed that GhSRK2D was expressed in various cotton tissues and organs, the highestlevel expression of GhSRK2D gene was identified in leaf organs. GhSRK2D was also induced by ABA, high salt, hypertonic (mannitol) and low temperature treatments. These results suggested that GhSRK2D was likely involved in abiotic stress physiological processes in cotton.

Key words: cotton, ABA, abiotic stress; , GhSRK2D/GhSnRK2.2

中图分类号:

Q78
S562

林发壮1,2,张锐1,孙国清1,孙豹1,郭三堆1*. 棉花GhSRK2D基因的分子克隆及其功能分析[J]. , 2012, 14(6): 36-42.

LIN Fa-zhuang1,2, ZHANG Rui1, SUN Guo-qing1, SUN Bao1, GUO San-dui1*. Molecular Cloning and its Functional Analysis of GhSRK2D Gene from Cotton[J]. , 2012, 14(6): 36-42.

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棉花GhSRK2D基因的分子克隆及其功能分析

Molecular Cloning and its Functional Analysis of GhSRK2D Gene from Cotton

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