高等植物的分枝发育决定着植物地上株型系统,与植物生物量和作物产量密切相关。植物分枝发育受环境因素、遗传因素和植物激素多重调控。近年来通过对各种突变体的研究,人们对植物分枝发育调控机制的认识不断深入,克隆到了一系列重要基因。目前对于植物分枝发育调控机制的研究已成为作物分子遗传育种的重要依据。
e型杂交水稻是高秆隐性杂交水稻的简称。20多年来,世界各国科学家关注并致力于水稻高秆隐性(eui)基因的发现、研究与利用。现在将最近几年所取得实质性的明显进展与前景做一概述。
近年来,谷子生物技术发展迅速,特别是谷子SSR标记的开发、遗传图谱的构建、EST数据库建立、QTL定位等基础工作取得了较大的发展。即将完成的谷子基因组测序,也加速了谷子分子标记和功能基因组研究的进程,提升了研究水平。主要对谷子分子标记和功能基因组方面的研究进展进行了总结,提出谷子功能基因的标记定位与发掘,建立分子标记数据基础和高效外源基因转化平台的建立是未来谷子基因组研究的关键工作,并对谷子基因组的研究发展进行了展望。
叶酸是指四氢叶酸及其衍生物这一类物质,是介导一碳单位转移的重要辅助因子,参与生物体内许多重要反应。人类不具备自身合成叶酸的能力,只能从植物中摄取,叶酸缺乏会增加许多疾病风险,利用生物强化来提高植物的叶酸含量是一个解决全球性叶酸缺乏问题的可行办法之一。综述了叶酸的合成及代谢途径,重点介绍了目前叶酸生物合成的研究进展;阐述了我国的叶酸营养状况,并对我国的叶酸强化进行了展望。
利用微生物从低廉的纤维素、半纤维素及其水解产物生产生物燃料乙醇受到高度重视。代谢工程技术构建和改造高产乙醇重组菌成为研究的重点。着重概述了产乙醇重组大肠杆菌的研究进展。以大肠杆菌作为模式菌株进行乙醇代谢工程改造的研究和探索,将为新型的产乙醇重组微生物提供技术依据和借鉴。
随着人们对名特优新农产品需求的快速增长和跨地区贸易的迅速发展,消费者对农产品原产地信息也越来越重视。近年来,国内外开展了一些应用多元素及同位素“指纹”分析技术对农产品进行原产地判定的探索性研究。研究表明利用氢、氧、碳、氮、硫、锶同位素比及多元素含量特征可对农产品进行原产地判定。综述了多元素及同位素“指纹”分析技术在肉品、乳制品、饮品原料、谷物、葡萄酒等农产品原产地判定中的研究进展,为未来相关研究的发展和农产品原产地保护工作提供理论基础。
蜂王浆是重要的蜂产品,它不仅是调控蜜蜂发育和级型分化的营养食物,而且对动物和人体保健均具有非常有效的生理活性。介绍了王浆的活性成分,整体成分和主要活性成分王浆酸、王浆蛋白及多肽的营养保健功能,阐明了王浆与寿命和生殖力相关的分子机理研究新进展,并根据国内外最新研究趋势,提出了重视王浆基础研究,发展深加工和生物工程产业的相关建议。
加入WTO后,面对农业发展进入新阶段和多元化的国际环境,中国农业支持的空间发生了巨大变化,迫切需要构建农业支持政策分析决策系统。分析了农业支持政策分析所面临的决策问题和决策流程,对系统的功能和逻辑结构进行了构想,建立该系统将有助于促进我国农业支持政策分析由定性向定量研究的转变。
microRNAs(miRNAs)是真核生物中一类长度约为22 nt的非编码小分子RNA,miRNA与AGO等蛋白形成RISC沉默复合体,通过剪切或翻译抑制对靶基因起负调控作用。对拟南芥miRNA序列及其配对的靶序列间的特征进行了统计分析,结果表明miRNA序列5′端富含A、U,第1、第19碱基位对U、C具有较强的倾向性;miRNA与靶序列间常有1~4个碱基错配,错配碱基常出现在第1,第2和第21位,而第3~第6,第9~第10,第16~第17碱基配对较为保守,为人工合成miRNA的设计及miRNA靶基因的预测以提供了依据。
采用灌喂试验研究AA肉鸡对海藻糖的吸收机理,以及日粮添加海藻糖对AA肉鸡生长及屠宰性能的影响,结果表明,海藻糖是以完整二糖形式直接吸收进入血液,而其他二糖一般分解为葡萄糖后吸收,此为海藻糖消化吸收原理方面的新发现。日粮添加海藻糖能显著促进肉鸡的生长,降低死淘率,显著提高半净膛率和全净膛率,提高屠宰性能。以0.1%添加量效果最优,可显著提高肉鸡体重9.42%(P<0.05),料肉比显著低于对照组(P<0.05)。
通过设计简并引物和构建基因组文库的方法从链霉菌Streptomyces sp.S9中克隆得到β-l,4-木聚糖酶基因xynBS9。该基因全长1 023 bp,编码340个氨基酸。将不带原基因信号肽编码序列的xynBS9以正确阅读框架克隆到表达载体pET-22b(+)上,并在大肠杆菌BL2l(DE3)中诱导表达。重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和疏水柱纯化后达到电泳纯。酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为60℃,最适pH为6.5,在碱性条件下具有良好的稳定性。
通过富集培养的方法从农药厂废水曝气池的活性污泥中筛选到了一株既具有甲基对硫磷降解活性又可以有效降解4-硝基酚的高效菌株1-7,经16S rDNA鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.)。根据4-硝基酚降解相关基因保守区设计简并引物扩增小片段,再应用TAIL-PCR克隆得到偏苯三酚1,2-双加氧酶基因dio1,基因全长873 bp,编码290个氨基酸,酶蛋白理论分子量为32.8 kDa。 doi1基因在E. coli BL21中过量表达,并通过Ni-NTA亲和层析纯化,结果表明该酶具有正常的生物学活性,证明了假单胞菌1-7可以通过偏苯三酚途径降解4-硝基酚。初步探讨了假单胞菌1-7的4-硝基酚降解机制。
对虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus intermedius) 患“黑嘴病”及生殖后体腔液中5种生理生化指标进行了检测,结果表明病理情况下的虾夷马粪海胆过氧化氢含量和丙二醛含量明显高于对照组,而过氧化氢酶活性、超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力明显低于对照组,其中,过氧化氢含量、总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性差异显著(P<0.05),丙二醛含量、过氧化氢酶活性差异极显著(P<0.01)。生殖后除过氧化氢含量外其他4种生理生化指标均降低,其中总抗氧化能力和丙二醛含量差异显著(P<0.05),过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性差异极显著(P<0.01)。研究表明以海胆体腔液中丙二醛含量和过氧化氢酶活性作为海胆黑嘴病发生的监测指标是可行的。
研究镁铝钴复合氧化物新型催化剂的合成,并以此催化剂催化合成农产品保鲜新材料环氧乙烷高级脂肪醇(OHAA)。薄层色谱表明镁铝钴复合氧化物催化合成的OHAA分布指数达到80%以上,具有很好的窄分布效果。通过催化剂用量、反应温度、反应压力三者间的L9(33)正交试验,得出镁铝钴复合氧化物催化OHAA合成的最佳反应条件为催化剂用量3%,温度160℃, 压力0.6 MPa。
拟南芥中有29个被称为AHL的蛋白质 (AT-hook motif nuclear localized protein),但是大多数AT-hook蛋白的功能未知,其中AHL27蛋白含有一个AT-hook基序和一个PPC结构域。AHL27在不同器官的mRNA表达和GUS 组织化学染色分析表明,AHL27主要在根和花中表达;GFP-AHL27亚细胞定位显示AHL27蛋白是一个核定位蛋白。AHL27基因的过量表达,可抑制开花基因FT的表达,同时促进FLC的表达,从而延迟拟南芥在长日和短日条件下的开花时间。研究表明,AHL27基因在拟南芥的生长发育中起重要作用。
抗坏血酸过氧化物酶(APX)是植物中抗坏血酸-谷胱甘肽(ASA-GSH)循环中清除逆境条件下产生的H2O2的关键酶之一。为探索APX在细胞质雄性不育(CMS)中的作用机理,本实验通过构建含不同长度的APX cDNA序列的pGADT7融合载体,利用酵母双杂交系统分析ATP6和APX之间的相互作用及其作用位点,结果显示APX的C端250~439位氨基酸序列与ATP6的氨基酸序列具有相互作用。
利用农杆菌介导法将耐草甘膦基因2mG2-epsps转入烟草,获得87株PCR阳性植株,阳性率为43%。对PCR阳性植株进行Southern杂交、RTPCR、Western 杂交和ELISA分析,结果显示外源基因已经整合到烟草基因组中并高效表达,转基因植株的叶片中2mG2-EPSPS蛋白的最高表达量可达26.03 μg/g 鲜重。转基因烟草草甘膦耐受性分析显示,其中有15个转化事件表现出较好的草甘膦耐受性,对草甘膦的耐受性可达到1%。转基因植株的种子可以在10 mmol/L草甘膦异丙铵盐浓度下萌发,T1代转基因烟草幼苗可以耐受浓度为0.8%的草甘膦。研究结果表明转2mG2-epsps基因烟草具有较高的草甘膦耐受性,2mG2-epsps基因可以用于耐除草剂转基因作物的培育。
采用连续收集法提取到花生植株的根系分泌物,并就花生根系分泌物对根腐镰刀菌36194和固氮菌14046的化感作用进行了初步研究。结果表明,花生根系分泌物的中性、酸性和碱性组分对根腐镰刀菌菌丝的生长均存在一定的化感促进作用,对固氮菌的生长存在一定的化感抑制作用,并随添加浓度的增加化感作用增强。中性组分的化感作用相对更强些。GC-MS分析显示中性组分共含有2,4-二甲基苯甲醛、月桂酸、豆寇酸、软酯酸、油酸、硬酯酸等6种主要成分。
自青藏高原若尔盖高寒湿地距离表层80 cm深处的土壤中分离筛选到一株具有高纤维素分解活性的兼性厌氧菌株H-2。根据形态学、生理生化特征和16S rDNA分子生物学手段鉴定其为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。对H-2菌株的产酶条件研究表明,羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethyl cellulose-Na,CMC-Na)为最佳碳源;在1.5% CMC-Na,30℃、180 rpm振荡培养24 h,H-2产酶活性最高;15℃时,H-2仍保持80%产酶活性。对H-2菌株的纤维素酶活性条件进行初步研究表明,pH 7.0、温度40℃时,该菌株所产纤维素酶的活力最高,可达15.443 U。
为了对玉米中表达的植酸酶蛋白的酶学性质进行深入研究,以转基因玉米籽粒中提取的植酸酶粗提液为研究材料,探索了植酸酶和总蛋白的溶解度与硫酸铵饱和度之间的关系,结果显示在0~60%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶仅占初提液中总植酸酶含量的1.85%,而在此范围内沉淀的总蛋白却占初提液的总蛋白含量的57%,植酸酶比活为0.44 U/mg;在60%~80%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶和总蛋白分别占初提液中各自含量的58%和10%,植酸酶比活为84.4 U/mg;在80%~90%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶收率占初提液中含量的1.9%。因此选用60%~80%硫酸铵饱和度分级沉淀植酸酶,在此条件得到的植酸酶比活比粗提液的植酸酶比活(13.8 U/mg)高6.1倍。
为检测转基因抗虫棉中的Bt Cry1A基因的表达,采用地高辛随机引物法标记探针、化学发光检测的Southern杂交技术,通过纯化探针、使用最适探针浓度、优化真空转印、杂交及免疫检测方法等一系列优化过程,最终得到背景低、信号强的Southern杂交结果。
以蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum Imai.)野生子实体和人工液体培养的菌丝体为研究对象,采用常规热水浸提法,对影响多糖提取得率的因素以正交试验的方法进行优化。结果表明,蒙古口蘑子实体多糖提取的最佳工艺为:提取时间4 h,提取4次,提取温度70℃,醇析浓度80%,料液比1∶10,经此工艺子实体的多糖得率为5.78%;菌丝体多糖提取最优工艺为:提取时间3 h, 提取3次,提取温度90℃,醇析浓度80%,料液比1∶10,经此工艺菌丝体的多糖得率为5.93%。
以白三叶为原料,通过添加青宝Ⅱ号(FS)、纤维素酶(CE)、糖蜜(M)和甲酸(FA)等添加剂,研究添加剂对白三叶青贮饲料发酵品质和体外消化率的影响。结果表明:白三叶能单独青贮,但不能获得发酵品质优良的青贮饲料;添加甲酸可显著提高青贮饲料的可溶性糖含量,降低pH值和氨态氮含量(P<0.05);添加糖蜜可显著提高青贮饲料的乳酸和可溶性糖含量,显著降低pH值、氨态氮含量,减少中性和酸性洗涤纤维含量(P<0.05);青宝Ⅱ号以及青宝Ⅱ号和纤维素酶的混合添加可显著提高乳酸含量,降低pH值(P<0.05)。不同添加剂及组合对白三叶青贮料的干物质、粗蛋白质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的体外消化率等具有不同影响。